摇瓶机培养方法在浸没培养过程中振荡的目的在于改善活细胞的氧气和营养物的供给。培养通常以特定生长条件下的培养物接种,也可用孢子接种。在绝大多数情况下,接种量有一较佳浓度,此在开始之前,须通过预试加以确定。而在整个摇瓶发酵过程中保持相对无菌是成功地实施这项技术的必要保证。 摇瓶机培养的机械装置主要由用于放置和固定烧瓶的平台以及牵引其运转的马达和运转系统组成,需安装于有维持恒温和恒湿自动调节能力的隔热室内。 目前也有具备恒温装置的小型台式摇床。 摇床的设计和使用性能主要从下列几项入手:(1)所使用的设备,(2)平衡要求,(3)摇床的大小、型号,(4)培养条件及恒温调控,(5)试管或小型发酵器的振荡培养性能。 摇瓶机细菌培养试验步骤: 1、复苏:根据所培养的细菌选择适宜的培养基,大部分细菌在LB培养基中在超净工作台先用1毫升左右的适宜的培养基溶解冷冻菌,然后转移到10毫升中试管(放入4毫升液体培养基)中,一般在37摄氏度摇床静止或低转速培养12小时或者过夜(温度取决于所培养的细菌适宜生长的温度)。 2、平板划线培养:在平板(琼脂+液体培养基)划线,放37摄氏度培养箱培养箱中倒置培养6小时~12小时,在平板上观察是否形成了单菌落. 3、挑单菌落:在超净台中挑选典型单菌落,置入10毫升中试管(内有5毫升液体培养基)中,在37摄氏度摇床,转速200转培养12小时或者过夜,肉眼能看到试管浑浊。 4、按照1:20的比例将中试管中的菌液移到250毫升三角瓶,培养条件同前。 |